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   问题:

【关于单酶切,片段和载体在进行单酶切的时候,是不是载体和片段同时要去磷酸化,想请教有做过这方面实验的达人,】

问题描述:

关于单酶切,片段和载体

在进行单酶切的时候,是不是载体和片段同时要去磷酸化,想请教有做过这方面实验的达人,

丁志刚回答:

  都去磷酸化就无法重组了(重组实际上是DNA末端形成磷酸二脂键,如果没有磷酸基团,则无法形成二脂键)

  应该是只对载体去磷酸化,避免载体自连.

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